Sau3AI är ett restriktionsenzym som finns i Staphylococcus aureus. Dess funktion är att klyva DNA-strängar vid sekvensen GATC. Den klyver inte rakt av utan skapar klistriga ändar, det vill säga ena delen skjuter ut.

Igenkänningssekvens:
5' GATC
3' CTAG

Efter klyvning:
5' ---   GATC--- 3'
3' ---CTAG   --- 5'