Salkowskis reagens[1] eller Salkowskis test är ett reagens för att påvisa terpenoider (som till exempel kolesterol).[2][3][4] Det har fått sitt namn efter Ernst Leopold Salkowski,[2] har utvecklat flera kemiska tester för att bestämma olika typer av molekyler (förutom kolesterol och andra steroler) såsom kreatinin, kolmonoxid, glukos och indoler.[5]

Om man löser terpenoider i kloroform och försiktigt tillsätter koncentrerad svavelsyra får man ett tvåfassystem där kontaktytan eller kloroformdelen är röd.[6]

Grundläggande metodbeskrivning redigera

Förfarande redigera

Till Salkowskitestet behövs, förutom ett prov som ska testas för steroler, kloroform och koncentrerad svavelsyra (Salkowskis reagens). Vanligtvis bereds först en lösning av kloroform och provet i ett provrör som senare behandlas med koncentrerad svavelsyra. Därefter skakas lösningen väl.[2][7] Det är viktigt att endast använda torra glaskärl, eftersom en uttorkningsreaktion inträffar under testet.[8]

Testen är kvalitativ och ger en lösning med två distinkta lager i provröret. Det övre skiktet (kloroform) får blåröd till violett färg, medan skiktet av svavelsyra blir gult till grönt med en grönaktig glöd. Om ett prov inte innehåller kolesterol eller andra steroler behåller den testade lösningen sin ursprungliga färg.[2][9][10][11]

Salkowskitestet kan också användas för att bestämma närvaron av indoler (kristallina alkaloider som är en nedbrytningsprodukt av proteiner som innehåller tryptofan).[12] I sådana fall behandlas provet med salpetersyra och 2-procentig lösning av kaliumnitrit, varvid positiv reaktion visas genom närvaron av röd färg.[13]

Testets kemi redigera

Behandling av en lösning av ett prov, innehållande steroler, med kloroform och mycket hygroskopisk svavelsyra, leder till en uttorkningsreaktion (två vattenmolekyler flyttas från två kolesterolmolekyler) och bildning av nya dubbelbindningar. Under den kemiska reaktionen binds två steroler samman och bisterol (bisteroid) bildas. bi-kolestadien (dubbel kolesten med två dubbelbindningar) i fallet kolesterol. Röd färg på en lösning är en följd av bisulfonsyra av en bi-kolestadien, som är en produkt av svavelsyrasulfonerande bi-kolestadien.[11][14][15]

Referenser redigera

Den här artikeln är helt eller delvis baserad på material från engelskspråkiga Wikipedia, Salkowski's test, 5 augusti 2022.

Noter redigera

  1. ^ Rahman, Atiqur; Sitepu, Irnayuli R.; Tang, Sui-Yan; Hashidoko, Yasuyuki (2010). ”Salkowski's reagent test as a primary screening index for functionalities of rhizobacteria isolated from wild dipterocarp saplings growing naturally on medium-strongly acidic tropical peat soil”. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry 74 (11): sid. 2202–2208. doi:10.1271/bbb.100360. ISSN 1347-6947. PMID 21071871. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21071871/. 
  2. ^ [a b c d] ”Salkowski test for cholesterol - Its principle and procedure” (på amerikansk engelska). Medical Study Zone. 2017-04-05. https://medicalstudyzone.com/salkowski-test/. Läst 10 maj 2021. 
  3. ^ ”Salkowski test” (på engelska). Oxford Reference. https://www.oxfordreference.com/view/10.1093/oi/authority.20110803100438192. Läst 10 maj 2021. 
  4. ^ Lipids1. 2012-01-14. https://www.slideshare.net/ariannarecio/lipids1. Läst 10 maj 2021. 
  5. ^ Djordjevic, Svetolik P.; Djordjević, Svetolik P. (2004) (på engelska). Dictionary of Medicine: French-English with English-French Glossary. Schreiber Pub. ISBN 978-1-887563-84-0. https://books.google.com/books?id=Elx9GJ9qrtwC&q=Salkowski+indole+cholesterol+creatinine&pg=PA762 
  6. ^ Abdul Latif, 2013, Physiochemical Standardization of Market Sample of Gul-e-Zofa (Nepeta bracteata Benth.), Int. Journ. of Drug Formulation and Research, 09/2013; 4(4), sid. 80.
  7. ^ Zahim, Duaa; Al-Saedi, Dalal. ”General Biochemistry”. General Biochemistry. https://www.kau.edu.sa/Files/0017586/Subjects/Bioc-371.pdf. Läst 10 maj 2021. 
  8. ^ Sharma, D. C. (2007) (på engelska). Practical Medical Biochemistry. BI Publications Pvt Ltd. ISBN 978-81-7225-246-5. https://books.google.com/books?id=r4XVZUpIX5AC&q=salkowski+test&pg=PA17 
  9. ^ ”Salkowski-Probe” (på tyska). Academic dictionaries and encyclopedias. https://medizin.de-academic.com/17496/Salkowski-Probe. Läst 10 maj 2021. 
  10. ^ ”Salkowski test” (på amerikansk engelska). Chemwatch. https://www.chemwatch.net/resource-center/salkowski-test/. Läst 10 maj 2021. 
  11. ^ [a b] ”SCIENCE bio”. www.coursehero.com. https://www.coursehero.com/file/p1bkc20/The-second-test-performed-is-the-Salkowski-test-This-test-is-similar-to/. Läst 10 maj 2021. 
  12. ^ ”Definition of INDOLE” (på engelska). www.merriam-webster.com. https://www.merriam-webster.com/dictionary/indole. Läst 10 maj 2021. 
  13. ^ ”Salkowski test” (på engelska). Academic Dictionaries and Encyclopedias. https://medicine.en-academic.com/167413/Salkowski_test. Läst 10 maj 2021. 
  14. ^ Selan, Karmen (2008). ”Vrednotenje izbranih kolorimetričnih metod za določanje koncentracije steroidov : diplomsko delo”. repozitorij.uni-lj.si. https://repozitorij.uni-lj.si/IzpisGradiva.php?id=123070. 
  15. ^ ”How does Salkowski's Test for Steroid content work?” (på engelska). ResearchGate. https://www.researchgate.net/post/How-does-Salkowskis-Test-for-Steroid-content-work. 

Externa länkar redigera

  • Kort video av Salkowskis test utfört på Youtube av Dr. Magdy Elnashar: Del 1, Del 2